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2022
12-16目前有多種蛋白標(biāo)記技術(shù)來幫助我們研究感興趣的蛋白質(zhì)的豐度、位置、相互作用、翻譯后修飾、功能，乃至監(jiān)測活細(xì)胞中的蛋白質(zhì)運(yùn)輸?shù)葐栴}。目前有多種類型的標(biāo)記物和標(biāo)記方式可供選擇，但是針對(duì)特定的應(yīng)用應(yīng)當(dāng)選擇適合的標(biāo)記策略。代謝標(biāo)記策略代謝標(biāo)記策略是一種體內(nèi)標(biāo)記方法，在這種方法中，細(xì)胞被“喂養(yǎng)”了化學(xué)標(biāo)記的營養(yǎng)物，然后這些標(biāo)記物被摻入新合成的蛋白質(zhì)、核酸或代謝物中。然后，我們可以收集細(xì)胞并分離這些分子以獲得細(xì)胞生物過程的全局視圖。蛋白同位素標(biāo)記原理：蛋白同位素標(biāo)記是一種經(jīng)典的蛋白示蹤和蛋...
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12-9(一)獲得目的基因1、通過PCR方法：以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板，按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn))，PCR循環(huán)獲得所需基因片段。2、通過RT-PCR方法：用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA，以mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈，以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體1、熒光素標(biāo)記的生物素載體酶切：將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切，酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后，用膠回收Kit或凍融法回收載...
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12-8蘇木精是從熱帶植物蘇木中提取的一種色素，蘇木精不能直接染色，必須暴露在空氣中變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)-“成熟"后才能使用。蘇木素和伊紅在組織學(xué)上被經(jīng)常使用，與碘液不同，這是一種染色劑。其他常用的含有蘇木素的染色劑有磷鎢酸蘇木素染色劑，也就是磷鎢酸與蘇木素的混合物。蘇木素染色劑經(jīng)常為組織的研究使用。明礬和三價(jià)鐵鹽常常被用作媒染劑，展示核和細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)。這些媒染劑的原理都是形成媒染劑-染料-組織復(fù)合體，從而顯示顏色。使用的鹽不同顏色也不同：當(dāng)用鐵鹽呈現(xiàn)深藍(lán)色顏色沉淀，用鋁鹽通常...
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12-2背景資料人絨毛膜促性腺激素(HumanChorionicGonadotropin，HCG)是由胎盤的滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，由α和β兩個(gè)亞基組成的異源二聚體。α亞基與垂體分泌的黃體生產(chǎn)素(LH)、促卵泡激素(FSH)和促甲狀腺激素(TSH)相似，β-亞基是HCG所特異的結(jié)構(gòu)。HCG的主要功能是刺激黃體，有利于雌激素和黃體酮的持續(xù)分泌，促進(jìn)子宮蛻膜的形成，使胎盤生長成熟。受精卵在子宮內(nèi)著床后，由胚胎發(fā)育為胎兒的過程中，胎盤的滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生大量的HCG，HCG可通過血液循環(huán)排...
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12-2背景資料促黃體激素(Luteinizinghormone，LH)也叫黃體生成素、促間質(zhì)細(xì)胞激素，是腺垂體前葉細(xì)胞分泌的一種糖蛋白類促性腺激素，由α和β兩條多肽組成的異源二聚體，存在于人的血液和尿液中。對(duì)于女性來說，LH與促卵泡刺激素(FSH)共同作用促進(jìn)卵泡成熟與排卵，使卵泡破裂形成黃體，并分泌雌激素和孕激素。LH的產(chǎn)生受下丘腦促性腺釋放激素的控制，同時(shí)受卵巢的正、負(fù)反饋調(diào)控。對(duì)于男性來說，LH的作用是促進(jìn)睪丸間質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育及睪酮的分泌。男性LH的正常值為1.24-8.62m...
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11-30WesternBlot雖然是科學(xué)研究中很基礎(chǔ)平常的實(shí)驗(yàn)，但想得到一個(gè)好的WB結(jié)果卻相當(dāng)困難。WB的操作步驟十分瑣碎，需要注意的細(xì)節(jié)也很多。漂亮的WB結(jié)果幾乎算得上是高分文章的標(biāo)配，能為文章增色不少。工欲善其事必先利其器，Bioss現(xiàn)為您提供分類細(xì)致、專業(yè)全面的《WB全套試劑選擇指南》，助您產(chǎn)出WB結(jié)果，在科研道路上馳騁前行！WB配套試劑表※產(chǎn)品信息以為準(zhǔn)。WesternBlot全套試劑優(yōu)勢：全：品種完善，涵蓋WB相關(guān)的全線產(chǎn)品，無須擔(dān)心產(chǎn)品兼容問題，一次性購買齊全。快：產(chǎn)品使...
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11-30背景資料降鈣素原(PCT，Procalcitonin)是激素降鈣素(CT)的肽類前體，由116個(gè)氨基酸組成，分子量大約13kDa的蛋白。PCT由神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞（甲狀腺、肺和胰腺組織的C細(xì)胞）分泌產(chǎn)生。在正常情況下，CT-mRNA在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)翻譯成141個(gè)氨基酸殘基的降鈣素原前體(Pre-PCT)，分子量約為16kDa，后經(jīng)一系列水解酶作用最終形成一個(gè)含57個(gè)氨基酸的N末端多肽、降鈣素和羧基端鈣抑肽。健康人的血清中PCT含量極低，其值通常＜0.05ng/mL。PCT濃度的升高可能...
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11-29背景資料前列腺特異性抗原(Prostate-specificantigen，PSA)是主要由前列腺上皮細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白分解酶，分子量約為33-35kDa，具有絲氨酸蛋白水解酶活性。正常情況下PSA被分泌入前列腺液或精液中，以有活性的游離形式(FPSA)存在。PSA在血液中的含量極其微少，只有當(dāng)前列腺組織發(fā)生炎癥或癌變的時(shí)候，血清中的PSA才會(huì)升高。血清中的PSA主要以結(jié)合形式(CPSA)存在，通常以FPSA與CPSA的和即總PSA(TPSA)，代表血清總的PSA水平。PSA參與...
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